提示词描述

1. 动物模型构建与分组给药 1.1 造模试剂准备 牛II型胶原：具有免疫原性天然结构的胶原，冻干粉，纯度>95%。 弗氏完全佐剂 冰醋酸：分析纯，胶原溶剂。 1.2 动物选择与伦理 选择6-8周龄，体重160-200g的Wistar雌性大鼠（Wistar大鼠对胶原诱导的关节炎更敏感，发病率高。如果Wistar大鼠不可用，可以使用SD大鼠作为替代）。每组10-12只大鼠，考虑到模型失败的可能性，可以适当增加建模组的数量。SPF级动物房，温度22±2°C，相对湿度55±5%，12小时光/暗循环，适应性喂养7天。在开始动物实验之前，必须获得伦理批准。 1.3 CIA模型诱导方案 a. 胶原溶液的制备：在无菌条件下，将牛II型胶原冻干粉溶解在0.05 M或0.1 M冰醋酸中，使其最终浓度为2 mg/mL。此步骤应在4°C下进行，缓慢搅拌过夜，避免剧烈摇晃以防止胶原变性。溶解的胶原溶液应清澈透明或略带乳光。 b. 乳液制备：在冰浴条件下，将胶原溶液与等体积的弗氏完全佐剂混合并乳化（使用高速组织匀浆器或通过三通阀用两个玻璃注射器反复推拉）。 c. 初次免疫：在大鼠吸入麻醉（异氟烷）后，剃掉背部毛发并消毒。注射部位：尾根背侧皮内多点注射。 d. 加强免疫：初次免疫7天后进行加强免疫，剂量与初次免疫相同，避开原始注射部位。 1.4 分组和给药方案 大鼠在初次免疫后10-14天开始出现关节红肿症状。此时，根据关节炎评分或体重将大鼠随机分组，以确保各组之间的基线一致性。 秦艽提取物已显示出在100 mg/kg剂量下具有显着的抗炎作用。为了观察清晰的剂量-反应关系并覆盖代谢调节的阈值，设计了100、200和400 mg/kg三个梯度。提取物需要悬浮在0.5%羧甲基纤维素钠溶液中，并从建模后的第14天开始给药，持续28天，直到第42天。 组别 样本量 药物 剂量 给药途径/频率 空白对照组 10 0.9%生理盐水或0.5% CMC-Na 等体积 灌胃/每日一次 模型组 12 同上 等体积 灌胃/每日一次 阳性对照组 10 甲氨蝶呤 3mg/kg 灌胃/每周两次 低剂量秦艽组 10 秦艽乙醇提取物 100mg/kg 灌胃/每日一次 中剂量秦艽组 10 秦艽乙醇提取物 200mg/kg 灌胃/每日一次 高剂量秦艽组 10 秦艽乙醇提取物 400mg/kg 灌胃/每日一次 2. 药效学评价部分 2.1 关节炎评分和肿胀程度（宏观） a. 观察频率：从