提示词描述

构建的重组质粒被导入大肠杆菌宿主菌株。常用的宿主菌株如BL21(DE3)或DH5α被使用，重组质粒通过热激或电穿孔导入细菌细胞。质粒进入细胞后，培养细菌溶液，并筛选抗性菌落以确认转化成功。随后，重组菌株在营养培养基中进行大规模培养。 在表达阶段，加入诱导剂以启动蛋白质表达。例如，常用的IPTG可以诱导携带T7启动子的基因高效表达；早期的生产方法也使用色氨酸启动子（trp启动子），在色氨酸耗尽后自动表达胰岛素前体。总而言之，通过优化表达条件和培养基配方，可以在大肠杆菌中获得高水平的胰岛素A链和B链（或前体蛋白）。