提示词描述

重组人胰岛素的制备始于人胰岛素基因的设计与合成。人胰岛素由两条肽链A和B组成；因此，通常设计两个合成基因：一个编码A链，一个编码B链。研究人员基于天然胰岛素氨基酸序列，优化*大肠杆菌*偏好密码子，并化学合成这两个基因片段。然后，使用限制性内切酶将A链或B链基因插入载体质粒中，构建重组表达质粒。该质粒还需要包含启动子和终止子等功能元件，以及抗生素抗性标记，以实现高效的基因转录和筛选。常用的表达载体通常带有强启动子（如T7或色氨酸启动子）和RBS，以驱动插入基因在宿主细菌中的高水平表达。 此处，A和B基因分别克隆到环状质粒中。如图所示，胰岛素原基因（包含A和B链序列）从左上方的细胞核中提取；右上角是使用限制性内切酶打开的环状质粒，载体包含启动子和抗性基因。酶切反应后，A链基因和B链基因连接到质粒的不同位点，形成用于下游表达的重组质粒。