提示词描述
阳性转化体(已成功整合CRISPR编辑载体)通过DsRed2红色荧光进行快速且无损的视觉筛选。随后,使用引物35S_F和Dm1_Cas9_304_R对T0代植物进行PCR。
原理和来源:
35S_F:靶向花椰菜花叶病毒35S启动子。该启动子驱动CRISPR载体上SpCas9基因和选择标记基因(如NPTII,潮霉素磷酸转移酶)的表达。
Dm1_Cas9_304_R:靶向SpCas9基因内的特定序列。
功能:这些引物的扩增产物提供了T-DNA区域成功整合到植物基因组中的直接证据。阳性结果表明该植物是真正的转化体,而不是逃避抗性筛选的假阳性。