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批准 这是我的项目提案的摘要。请为此生成一个示意图。 摘要：细胞分裂过程中蛋白质损伤和“老化蛋白质”的不对称分离被认为是衰老起始和细胞再生的关键机制。然而，现有研究主要依赖于观察少数荧光标记的分子，缺乏在分子水平上进行全局分析的能力，难以区分新的、旧的和受损的蛋白质。为了解决这些问题，本项目拟以人细胞为模型，结合活细胞荧光成像、代谢同位素标记和单细胞蛋白质组学，系统研究细胞分裂过程中姐妹子细胞之间蛋白质丰度、新/旧比例和受损成分的差异分离模式。通过构建SNAP-Omp25线粒体时间标记系统，我们旨在捕获不对称分离事件，并对严格配对的姐妹子细胞进行Astral DIA单细胞蛋白质组学分析，以获得高分辨率的分子读数。此外，我们将引入机器学习方法来提取稳定不对称分离的蛋白质和功能模块，并通过遗传和药理学干预验证其调控作用。这项研究将阐明人类细胞中蛋白质稳态重置和损伤隔离的分子机制，为理解衰老机制和相关疾病的干预策略奠定基础。