提示詞描述

重組人類胰島素的製備始於人類胰島素基因的設計與合成。人類胰島素由兩條肽鏈組成，分別為 A 鏈和 B 鏈；因此，通常設計兩個合成基因：一個編碼 A 鏈，另一個編碼 B 鏈。研究人員根據天然胰島素胺基酸序列，優化 *E. coli* 偏好密碼子，並化學合成這兩個基因片段。然後，使用限制酶將 A 鏈或 B 鏈基因插入載體質體中，構建重組表達質體。該質體還需要包含啟動子和終止子等功能元件，以及抗生素抗性標記，以實現有效的基因轉錄和篩選。常用的表達載體通常帶有強啟動子（例如 T7 或色氨酸啟動子）和 RBS，以驅動插入基因在宿主細菌中的高水平表達。 在此，A 基因和 B 基因分別被克隆到環狀質體中。如圖所示，胰島素原基因（包含 A 鏈和 B 鏈序列）從左上方的細胞核中提取；右上角是用限制酶打開的環狀質體，該載體包含啟動子和抗性基因。經過酶促反應後，A 鏈基因和 B 鏈基因被連接到質體上的不同位點，形成用於下游表達的重組質體。