
陽性轉化株已成功整合 CRISPR 編輯載體,可透過 DsRed2 紅色螢光進行快速且非破壞性的視覺篩選。隨後,使用引子 35S_F 和 Dm1_Cas9_304_R 對 T0 代植物進行 PCR。 原理與來源: 35S_F:目標為花椰菜花葉病毒 35S 啟動子。此啟動子驅動 CRISPR 載體上 SpCas9 基因和可選擇標記基因(例如 NPTII、潮黴素磷酸轉移酶)的表達。 Dm1_Cas9_304_R:目標為 SpCas9 基因內的特定序列。 功能:這些引子的擴增產物可直接證明 T-DNA 區域已成功整合到植物基因組中。陽性結果表示該植物是真正的轉化株,而不是逃脫抗性篩選的假陽性。

神經科學的進展...