Описание промпта

1. Создание животной модели и введение групп препаратов 1.1 Подготовка моделирующих реагентов Бычий коллаген II типа: Коллаген с иммуногенной нативной структурой, лиофилизированный порошок с чистотой > 95%. Полный адъювант Фрейнда Ледяная уксусная кислота: Аналитическая степень чистоты, растворитель коллагена. 1.2 Выбор животных и этика Выбирались самки крыс линии Wistar, 6-8 недель, весом 160-200 г (крысы Wistar более чувствительны к коллаген-индуцированному артриту и имеют высокую частоту заболеваемости. Если крысы Wistar недоступны, в качестве замены можно использовать крыс SD). 10-12 крыс в группе, с возможностью неудачи моделирования, количество моделирующих групп можно увеличить соответствующим образом. Животноводческое помещение SPF-класса, температура 22±2°C, относительная влажность 55±5%, цикл свет/темнота 12 ч, адаптивное кормление в течение 7 дней. До начала экспериментов на животных необходимо получить этическое одобрение. 1.3 Протокол индукции модели CIA a. Приготовление раствора коллагена: В стерильных условиях растворить лиофилизированный порошок бычьего коллагена II типа в 0,05 М или 0,1 М ледяной уксусной кислоте до конечной концентрации 2 мг/мл. Этот этап следует проводить при 4°C при медленном перемешивании в течение ночи, избегая энергичного встряхивания, чтобы предотвратить денатурацию коллагена. Растворенный раствор коллагена должен быть прозрачным и прозрачным или слегка опалесцирующим. b. Приготовление эмульсии: В условиях ледяной бани смешать раствор коллагена с равным объемом полного адъюванта Фрейнда и эмульгировать (с помощью высокоскоростного тканевого гомогенизатора или многократно проталкивая и вытягивая двумя стеклянными шприцами через трехходовой клапан). c. Первичная иммунизация: После того, как крысы анестезированы ингаляцией (изофлуран), спину бреют и дезинфицируют. Место инъекции: внутрикожная многоточечная инъекция в дорсальную сторону корня хвоста. d. Бустерная иммунизация: Бустерная иммунизация проводится через 7 дней после первичной иммунизации, в той же дозе, что и первичная иммунизация, избегая первоначального места инъекции. 1.4 Протокол группировки и введения У крыс начинают проявляться симптомы покраснения и отека суставов через 10-14 дней после первичной иммунизации. В это время крысы случайным образом группируются в соответствии с баллом артрита или массой тела, чтобы обеспечить согласованность исходных данных между группами. Экстракт Gentian macrophylla показал значительный противовоспалительный эффект в дозе 100 мг/кг. Чтобы наблюдать четкую зависимость доза-реакция и охватить порог метаболической регуляции, были разработаны три градиента 100, 200 и 400 мг/кг. Экстракт необходимо суспендировать в 0,5% растворе натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы и вводить с 14-го дня после моделирования, продолжая в течение 28 дней до 42-го дня. Группа Размер выборки Препарат Дозировка Путь введения/Частота Контрольная группа 10 0,9% физиологический раствор или 0,5% КМЦ-Na Равный объем Перорально/Один раз в день Модельная группа 12 То же, что и выше Равный объем Перорально/Один раз в день Группа положительного контроля 10 Метотрексат 3 мг/кг Перорально/Два раза в неделю Группа Gentian macrophylla в низкой дозе 10 Этанольный экстракт Gent