Описание промпта
Общий процесс экстракции и очистки рекомбинантного человеческого инсулина из телец включения E. coli выглядит следующим образом: Сначала тельца включения, содержащие белок слияния проинсулина, получают путем ферментации и индуцированной экспрессии. Затем клетки лизируют, и тельца включения извлекают, после чего промывают для удаления примесей. Далее тельца включения растворяют с использованием высокой концентрации денатуранта (например, мочевины) и подвергают окислительному сульфитолизу для поддержания проинсулина в развернутом состоянии и предотвращения неправильного образования дисульфидных связей. Затем N-концевой пептид слияния отщепляют с использованием бромистого циана (CNBr). После этого проводят замену буфера для удаления реакционных реагентов. Проинсулин затем очищают хроматографическими методами (такими как ионный обмен, обращенно-фазовая хроматография и т. д.) и/или методами, такими как осаждение pH и цинковая кристаллизация. После очистки проводят рефолдинг для восстановления его нативной конформации. Впоследствии C-пептид удаляют путем ферментативного переваривания с использованием трипсина и карбоксипептидазы B, в результате чего образуется биологически активная двухцепочечная структура инсулина. Наконец, проводят дальнейшую хроматографическую очистку и этапы приготовления лекарственной формы для получения рекомбинантного человеческого инсулина высокой чистоты или аналоговых продуктов.
![Научная иллюстрация:
```python
import matplotlib.pyplot as plt
import matplotlib.patches as mpatches
from matplotlib.patches import Rectangle, Ellipse, Polygon, FancyArrowPatch
import numpy as np
# Настройка китайского шрифта
plt.rcParams['font.sans-serif'] = ['SimHei']
plt.rcParams['axes.unicode_minus'] = False
fig, ax = plt.subplots(1, 1, figsize=(10, 8))
ax.set_xlim(0, 10)
ax.set_ylim(0, 8)
ax.axis('off')
# 1. Прорастание семян
ax.add_patch(Rectangle((1, 6), 1.5, 0.3, color='saddlebrown', alpha=0.7, label='MS Medium'))
ax.add_patch(Ellipse((1.5, 6.5), 0.3, 0.2, color='darkgreen', alpha=0.8, label='N. benthamiana seeds'))
ax.text(1, 6.8, '1. Семена прорастают на среде MS', fontsize=10, va='bottom')
# 2. Инокуляция Agrobacterium
ax.add_patch(Ellipse((4, 6.5), 0.5, 0.3, color='lightblue', alpha=0.7, label='Agrobacterium suspension'))
ax.text(3.2, 6.8, '2. Инокуляция Agrobacterium GV3101', fontsize=10, va='bottom')
# Стрелка, указывающая на процесс инокуляции
arrow = FancyArrowPatch((2.5, 6.5), (3.7, 6.5),
arrowstyle='->', color='red', linewidth=2)
ax.add_patch(arrow)
# 3. Инкубация в темноте
ax.add_patch(Rectangle((6, 5.8), 2, 1.4, color='black'
```](/_next/image?url=https%3A%2F%2Fpub-8c0ddfa5c0454d40822bc9944fe6f303.r2.dev%2Fai-drawings%2F1TlmQnMxbeuNTbpKoF6eI332tClU3piH%2F3ed380c1-9cc5-4e37-83e6-4c51fb42c6a2%2F26302c86-5b96-456e-b04b-bd25a362e066.png&w=3840&q=75)
