Описание промпта

Сконструированная рекомбинантная плазмида вводится в штаммы-хозяева E. coli. Используются распространенные штаммы-хозяева, такие как BL21(DE3) или DH5α, и рекомбинантная плазмида вводится в бактериальные клетки посредством теплового шока или электропорации. После того, как плазмида попадает в клетки, бактериальный раствор культивируется, и отбираются резистентные колонии для подтверждения успешной трансформации. Впоследствии рекомбинантный штамм культивируется в большом масштабе в питательной среде. Во время фазы экспрессии добавляется индуктор для инициации экспрессии белка. Например, широко используемый IPTG может индуцировать эффективную экспрессию генов, несущих T7 промотор; в ранних методах производства также использовался триптофановый промотор (trp промотор), который автоматически экспрессирует предшественник инсулина после истощения триптофана. В заключение, путем оптимизации условий экспрессии и составов питательной среды можно получить высокие уровни A-цепи и B-цепи инсулина (или белка-предшественника) в E. coli.