Описание промпта

Приготовление рекомбинантного человеческого инсулина начинается с разработки и синтеза гена человеческого инсулина. Человеческий инсулин состоит из двух пептидных цепей, A и B; поэтому обычно разрабатываются два синтетических гена: один кодирует цепь A, а другой – цепь B. Исследователи оптимизируют кодоны, предпочтительные для *E. coli*, на основе природной аминокислотной последовательности инсулина и химически синтезируют эти два генных сегмента. Затем рестрикционные ферменты используются для вставки гена цепи A или цепи B в векторную плазмиду, создавая рекомбинантную экспрессионную плазмиду. Плазмида также должна содержать функциональные элементы, такие как промоторы и терминаторы, а также маркеры устойчивости к антибиотикам, для обеспечения эффективной транскрипции гена и селекции. Обычно используемые экспрессионные векторы, как правило, несут сильные промоторы (такие как T7 или триптофановые промоторы) и RBS для обеспечения высокого уровня экспрессии вставленного гена в бактерии-хозяине. Здесь гены A и B клонируются отдельно в кольцевые плазмиды. Как показано на иллюстрации, ген проинсулина (содержащий последовательности цепей A и B) извлекается из клеточного ядра в верхнем левом углу; кольцевая плазмида, открытая рестрикционными ферментами, находится в верхнем правом углу, и вектор содержит промотор и ген устойчивости. После ферментативной реакции ген цепи A и ген цепи B лигируются в разные сайты на плазмиде, образуя рекомбинантную плазмиду для последующей экспрессии.