1. Основное изображение Создайте схематическую диаграмму в альбомном формате в стиле научной векторной иллюстрации, четко показывающую принцип работы модульной системы редактирования генов CRISPR-Cas9 для растений. 2. Подробное описание сцены (по модулям) Модуль 1: Плазмидный вектор (pDV003 - Слева) Нарисуйте большую кольцевую плазмиду. Обозначьте модуль "Pol II промотор (CmYLCV)" на кольце, от которого отходит длинная горизонтальная цепь РНК (полицистронный транскрипт). На цепи РНК выделите две целевые последовательности ярко-красным и ярко-оранжевым цветами, обозначенные как "gRNA: G5" и "gRNA: G4.2" соответственно. Каждая целевая последовательность окружена уникальными маркерами расщепления (например, ромбами или замочными скважинами), представляющими собой "сайты узнавания Csy4". Под кольцом плазмиды нарисуйте отдельную "кассету экспрессии репортерного гена", содержащую "FMV34S промотор" и иконки "mCherry, направленный в хлоропласт". Обозначьте область "сайт AarI и ген негативной селекции ccdB" в нижней части плазмиды. Модуль 2: Процессинг Csy4 и созревание gRNA (Посередине) Рядом с цепью РНК нарисуйте белок в форме синих или зеленых "молекулярных ножниц", обозначенный как "рибонуклеаза Csy4". Четко покажите, как Csy4 разрезает в двух сайтах узнавания, точно расщепляя длинную цепь РНК, чтобы высвободить две независимые, полные одноцепочечные gRNA. Модуль 3: Крупный план оптимизации структуры sgRNA (Посередине - Рамка лупы) Добавьте рамку крупного плана в стиле лупы к одной из высвобожденных gRNA. Внутри рамки сравните рядом: Слева (Стандартная): Простая короткая структура шпильки, с примечанием "Стандартная sgRNA" и последовательностью "TTTT". Справа (Оптимизированная): Структура со значительно более длинной шпилькой, с примечанием "Оптимизированная sgRNA (Dang et al.)". Укажите "удлинение двухцепочечной области (+5 п.н.)" и "ключевую мутацию (T→C)" стрелками и текстом. Модуль 4: Комплекс Cas9 и редактирование генов (Справа) Нарисуйте четкую структурную модель белка SpCas9 (многодоменная сборка). Покажите, как оптимизированная gRNA связывается с Cas9, образуя "рибонуклеопротеиновый комплекс Cas9/gRNA (RNP)". Нарисуйте две параллельные синие двойные спирали геномной ДНК, обозначенные целевыми точками "Геномный локус G5" и "Геномный локус G4.2". Покажите, как комплекс Cas9 связывается с целевой ДНК и создает "двухцепочечный разрыв ДНК (DSB)" выше PAM-последовательности (обозначен разрывом или символом молнии). 3. Стиль и визуальные требования Общий стиль: Простая, полуреалистичная научная векторная иллюстрация с четкими линиями и точной структурой. Цветовая схема: Используйте цветовые схемы научных журналов. Рекомендуется использовать синий цвет для ДНК и РНК.
