Descrição do Prompt

1. Construção do Modelo Animal e Administração dos Grupos 1.1 Preparação dos Reagentes de Modelagem Colágeno Bovino Tipo II: Colágeno com estrutura nativa imunogênica, pó liofilizado com pureza > 95%. Adjuvante Completo de Freund Ácido Acético Glacial: Grau analítico, solvente do colágeno. 1.2 Seleção Animal e Ética Ratos Wistar fêmeas, com 6-8 semanas de idade, pesando 160-200g, foram selecionados (ratos Wistar são mais sensíveis à artrite induzida por colágeno e têm uma alta taxa de incidência. Se ratos Wistar não estiverem disponíveis, ratos SD podem ser usados como substitutos). 10-12 ratos por grupo, com a possibilidade de falha do modelo, o número de grupos de modelagem pode ser aumentado apropriadamente. Sala de animais com grau SPF, temperatura 22±2°C, umidade relativa 55±5%, ciclo claro/escuro de 12h, alimentação adaptativa por 7 dias. A aprovação ética deve ser obtida antes do início dos experimentos com animais. 1.3 Protocolo de Indução do Modelo CIA a. Preparação da solução de colágeno: Em condições estéreis, dissolva o pó liofilizado de colágeno bovino tipo II em ácido acético glacial 0,05 M ou 0,1 M até uma concentração final de 2 mg/mL. Esta etapa deve ser realizada a 4°C com agitação lenta durante a noite, evitando agitação vigorosa para evitar a desnaturação do colágeno. A solução de colágeno dissolvida deve ser clara e transparente ou ligeiramente opalescente. b. Preparação da emulsão: Em condições de banho de gelo, misture a solução de colágeno com um volume igual de Adjuvante Completo de Freund e emulsifique (usando um homogeneizador de tecido de alta velocidade ou empurrando e puxando repetidamente com duas seringas de vidro através de uma válvula de três vias). c. Imunização inicial: Após a anestesia dos ratos por inalação (isoflurano), as costas são raspadas e desinfetadas. Local de injeção: injeção intradérmica multiponto no lado dorsal da raiz da cauda. d. Imunização de reforço: Uma imunização de reforço é realizada 7 dias após a imunização inicial, com a mesma dose da imunização inicial, evitando o local de injeção original. 1.4 Protocolo de Agrupamento e Administração Os ratos começam a apresentar sintomas de vermelhidão e inchaço nas articulações 10-14 dias após a imunização inicial. Neste momento, os ratos são agrupados aleatoriamente de acordo com a pontuação da artrite ou peso corporal para garantir a consistência da linha de base entre os grupos. O extrato de Gentiana macrophylla demonstrou efeitos anti-inflamatórios significativos na dose de 100 mg/kg. Para observar uma relação dose-resposta clara e cobrir o limiar da regulação metabólica, foram projetados três gradientes de 100, 200 e 400 mg/kg. O extrato precisa ser suspenso em solução de carboximetilcelulose de sódio a 0,5% e administrado a partir do 14º dia após a modelagem, continuando por 28 dias até o 42º dia. Grupo Tamanho da Amostra Droga Dosagem Via/Frequência de Administração Grupo Controle em Branco 10 Solução Salina a 0,9% ou CMC-Na a 0,5% Volume Igual Gavage/Uma Vez ao Dia Grupo Modelo 12 Igual ao anterior Volume Igual Gavage/Uma Vez ao Dia Grupo Controle Positivo 10 Metotrexato 3mg/kg Gavage/Duas Vezes por Semana Grupo Gentiana macrophylla em Baixa Dose 10 Extrato etanólico de Gentiana macrophylla 100mg/kg Gavage/Uma Vez ao Dia Grupo Gentiana macrophylla em Dose Média 10 Extrato etanólico de Gentiana macrophylla 200mg/kg Gavage/Uma Vez ao Dia Grupo Gentiana macrophylla em Alta Dose 10 Ext