
“Após a obtenção de cepas positivas, a cultura de fermentação em larga escala é realizada. A produção de insulina recombinante tipicamente emprega fermentação de alta densidade. Temperatura, pH e oxigênio dissolvido são controlados no fermentador, e nutrientes são fornecidos para promover o crescimento celular. O momento da indução pode ser ajustado durante o processo de fermentação de acordo com o design do vetor de expressão: por exemplo, IPTG é adicionado para induzir a expressão quando a densidade celular atinge um certo nível, ou um sistema de expressão de autocontrole do promotor é usado. Estratégias de regulação afetam o rendimento final. O uso de um biorreator profissional pode controlar o ambiente estéril e os parâmetros para maximizar o rendimento. A literatura relata que a fermentação de E. coli pode produzir centenas de miligramas de cadeias de insulina por litro de meio de cultura. Além disso, o controle da fermentação pode reduzir a produção de inibidores e melhorar o rendimento e a pureza de proteínas recombinantes.”
Representação esquemática de quatro genes chave envolvidos e...