프롬프트 설명

재조합된 플라스미드를 E. coli 숙주 균주에 도입합니다. BL21(DE3) 또는 DH5α와 같은 일반적인 숙주 균주를 사용하며, 열 충격 또는 전기천공법을 통해 재조합 플라스미드를 세균 세포에 도입합니다. 플라스미드가 세포 내로 들어가면 세균 용액을 배양하고, 내성 콜로니를 선택하여 형질전환 성공 여부를 확인합니다. 이후, 재조합 균주를 영양 배지에서 대량 배양합니다. 발현 단계 동안, 단백질 발현을 유도하기 위해 유도제를 첨가합니다. 예를 들어, 일반적으로 사용되는 IPTG는 T7 프로모터를 가진 유전자의 효율적인 발현을 유도할 수 있습니다. 초기 생산 방법에서는 트립토판 프로모터(trp 프로모터)를 사용하여 트립토판 고갈 후 인슐린 전구체를 자동적으로 발현시키기도 했습니다. 요약하자면, 발현 조건 및 배지 조성 최적화를 통해 E. coli에서 높은 수준의 인슐린 A-사슬 및 B-사슬 (또는 전구체 단백질)을 얻을 수 있습니다.