프롬프트 설명

재조합 인간 인슐린 제조는 인간 인슐린 유전자의 설계 및 합성으로 시작됩니다. 인간 인슐린은 A 사슬과 B 사슬의 두 펩타이드 사슬로 구성되므로 일반적으로 A 사슬을 암호화하는 유전자와 B 사슬을 암호화하는 유전자, 이렇게 두 개의 합성 유전자를 설계합니다. 연구자들은 자연적인 인슐린 아미노산 서열을 기반으로 *대장균* 선호 코돈을 최적화하고 이 두 유전자 조각을 화학적으로 합성합니다. 그런 다음 제한 효소를 사용하여 A 사슬 또는 B 사슬 유전자를 벡터 플라스미드에 삽입하여 재조합 발현 플라스미드를 구축합니다. 플라스미드는 효율적인 유전자 전사 및 선택을 위해 프로모터 및 종결자와 같은 기능적 요소와 항생제 내성 마커도 포함해야 합니다. 일반적으로 사용되는 발현 벡터는 숙주 박테리아에서 삽입된 유전자의 고수준 발현을 유도하기 위해 강력한 프로모터 (예: T7 또는 트립토판 프로모터) 및 RBS를 가지고 있습니다. 여기서 A 및 B 유전자는 원형 플라스미드에 개별적으로 클로닝됩니다. 그림과 같이 프로인슐린 유전자 (A 및 B 사슬 서열 포함)는 왼쪽 상단의 세포 핵에서 추출됩니다. 제한 효소로 개방된 원형 플라스미드는 오른쪽 상단에 있으며, 벡터는 프로모터와 내성 유전자를 포함합니다. 효소 반응 후 A 사슬 유전자와 B 사슬 유전자는 플라스미드의 서로 다른 부위에 연결되어 다운스트림 발현을 위한 재조합 플라스미드를 형성합니다.