Promptの説明

食道扁平上皮癌（ESCC）細胞の低酸素ストレスにおける14-3-3βのダウンレギュレーション機構とESCC進行促進における役割の研究をテーマに、実験記述を明確化し整理した技術ロードマップを作成する。1. HIF1Aと14-3-3βの関係性を確認する。関連実験として、異なるCOCL2濃度と誘導時間におけるHIF1Aと14-3-3βの変化、誘導後の14-3-3β mRNAレベルの変化、HIF1AノックダウンおよびHIF1A阻害剤PX-478添加後の14-3-3βの変化を含む。2. ESCC細胞における14-3-3βの表現型検証。MTTアッセイ、qPCR、コロニー形成アッセイを含む。3. 14-3-3βとミトコンドリアの関係性を調査する。ROS検出、オートファジーレベル、ミトコンドリア膜電位、ATPレベルの変化を含む。4. 14-3-3βとETFAの関係性を調べる。共免疫沈降（co-IP）、ミトコンドリア分離、核細胞質分離、ミトコンドリアおよび細胞質タンパク質の共免疫沈降を含む。5. 14-3-3βとETFAの作用機序とミトコンドリア機能への影響を解明する。14-3-3βノックダウン後のETFAタンパク質およびmRNAレベルの変化、細胞質ETFAレベルの変化、ミトコンドリア酸素消費量、β-脂肪酸の変化、フェロトーシス関連指標の変化を含む。6. in vivo実験：CDXおよび阻害剤誘導、腫瘍体積の変化、IHC、組織マイクロアレイ。