Descrizione del prompt
Il processo complessivo per l'estrazione e la purificazione dell'insulina umana ricombinante da corpi inclusi di E. coli è il seguente: Innanzitutto, i corpi inclusi contenenti la proteina di fusione proinsulina vengono ottenuti tramite fermentazione ed espressione indotta. Successivamente, le cellule vengono lisate e i corpi inclusi vengono recuperati, seguiti da lavaggio per rimuovere le impurità. Successivamente, i corpi inclusi vengono dissolti utilizzando un'alta concentrazione di denaturante (come l'urea) e sottoposti a sulfitolisi ossidativa per mantenere la proinsulina in uno stato non ripiegato e prevenire la formazione errata di ponti disolfuro. Quindi, il peptide di fusione N-terminale viene scisso utilizzando bromuro di cianogeno (CNBr). A questo segue uno scambio di tampone per rimuovere i reagenti di reazione. La proinsulina viene quindi purificata mediante metodi cromatografici (come scambio ionico, cromatografia a fase inversa, ecc.) e/o metodi come la precipitazione a pH e la cristallizzazione con zinco. Dopo la purificazione, viene eseguito il refolding per ripristinare la sua conformazione nativa. Successivamente, il peptide C viene rimosso mediante digestione enzimatica utilizzando tripsina e carbossipeptidasi B, generando la struttura insulinica a due catene biologicamente attiva. Infine, vengono eseguite ulteriori fasi di purificazione cromatografica e formulazione per ottenere insulina umana ricombinante o prodotti analoghi ad alta purezza.
![```python
import matplotlib.pyplot as plt
import matplotlib.patches as mpatches
from matplotlib.patches import Rectangle, Ellipse, Polygon, FancyArrowPatch
import numpy as np
# Configure Chinese font
plt.rcParams['font.sans-serif'] = ['SimHei']
plt.rcParams['axes.unicode_minus'] = False
fig, ax = plt.subplots(1, 1, figsize=(10, 8))
ax.set_xlim(0, 10)
ax.set_ylim(0, 8)
ax.axis('off')
# 1. Seed germination
ax.add_patch(Rectangle((1, 6), 1.5, 0.3, color='saddlebrown', alpha=0.7, label='MS Medium'))
ax.add_patch(Ellipse((1.5, 6.5), 0.3, 0.2, color='darkgreen', alpha=0.8, label='N. benthamiana seeds'))
ax.text(1, 6.8, '1. Seeds germinate on MS medium', fontsize=10, va='bottom')
# 2. Agrobacterium inoculation
ax.add_patch(Ellipse((4, 6.5), 0.5, 0.3, color='lightblue', alpha=0.7, label='Agrobacterium suspension'))
ax.text(3.2, 6.8, '2. Agrobacterium GV3101 inoculation', fontsize=10, va='bottom')
# Arrow indicating inoculation process
arrow = FancyArrowPatch((2.5, 6.5), (3.7, 6.5),
arrowstyle='->', color='red', linewidth=2)
ax.add_patch(arrow)
# 3. Dark incubation
ax.add_patch(Rectangle((6, 5.8), 2, 1.4, color='black'
```](/_next/image?url=https%3A%2F%2Fpub-8c0ddfa5c0454d40822bc9944fe6f303.r2.dev%2Fai-drawings%2F1TlmQnMxbeuNTbpKoF6eI332tClU3piH%2F3ed380c1-9cc5-4e37-83e6-4c51fb42c6a2%2F26302c86-5b96-456e-b04b-bd25a362e066.png&w=3840&q=75)
