
"Dopo aver ottenuto ceppi positivi, si procede con la coltura di fermentazione su larga scala. La produzione di insulina ricombinante impiega tipicamente la fermentazione ad alta densità. Temperatura, pH e ossigeno disciolto sono controllati nel fermentatore e i nutrienti vengono forniti per promuovere la crescita cellulare. La tempistica di induzione può essere regolata durante il processo di fermentazione in base alla progettazione del vettore di espressione: ad esempio, l'IPTG viene aggiunto per indurre l'espressione quando la densità cellulare raggiunge un certo livello, oppure viene utilizzato un sistema di espressione autocontrollata del promotore. Le strategie di regolazione influenzano la resa finale. L'utilizzo di un bioreattore professionale può controllare l'ambiente sterile e i parametri per massimizzare la resa. La letteratura riporta che la fermentazione di E. coli può produrre centinaia di milligrammi di catene di insulina per litro di terreno di coltura. Inoltre, il controllo della fermentazione può ridurre la produzione di inibitori e migliorare la resa e la purezza delle proteine ricombinanti."
Rappresentazione schematica di quattro geni chiave coinvolti...