Descrizione del prompt

I trasformanti positivi, che sono stati integrati con successo con il vettore di editing CRISPR, vengono rapidamente e non distruttivamente selezionati visivamente tramite fluorescenza rossa DsRed2. Successivamente, la PCR viene eseguita su piante T0 utilizzando i primer 35S_F e Dm1_Cas9_304_R. Principio e Fonte: 35S_F: Prende di mira il promotore 35S del virus del mosaico del cavolfiore. Questo promotore guida l'espressione del gene SpCas9 e dei geni marcatori selezionabili (come NPTII, igromicina fosfotransferasi) sul vettore CRISPR. Dm1_Cas9_304_R: Prende di mira una sequenza specifica all'interno del gene SpCas9. Funzione: Il prodotto di amplificazione di questi primer fornisce una prova diretta dell'integrazione della regione T-DNA nel genoma della pianta. Un risultato positivo indica che la pianta è un vero trasformante, piuttosto che un falso positivo sfuggito allo screening di resistenza.