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**제목:** 근접 표지 기술을 이용한 LNP 리소좀 탈출 매개 숙주 단백질 상호작용 해부 **주요 과학적 질문:** 1. LNP의 지질 성분은 어떻게 리소좀 탈출 효율에 특이적으로 영향을 미치는가? 탈출 효율을 결정하는 핵심 지질 구조적 특징이 있는가? 2. 리소좀 탈출의 중요한 시공간적 노드에서 LNP와 기능적으로 상호작용하는 숙주 세포 단백질은 무엇인가? 이러한 상호작용 단백질은 탈출 과정을 어떻게 매개하거나 방해하는가? **연구 방법:** 먼저, 다성분 지질 라이브러리를 구축하고 Siluc 리포터 시스템을 사용하여 LLC-luc 세포에서 스크리닝하여 리소좀 탈출 효율이 현저히 다른 "고탈출" 및 "저탈출" LNP를 식별한다. LNP의 세포 내 위치는 공초점 현미경을 사용하여 동적으로 추적하여 탈출 시간 창을 정확하게 결정한다. 이어서, 탈출의 중요한 시점에서 Ce6 광활성화 근접 표지 기술을 사용하여 LNP에 근접한 숙주 단백질을 시공간적으로 표지하고, 상호작용하는 단백질 그룹은 질량 분석법으로 식별한다. 고탈출 및 저탈출 LNP의 차등적 상호작용 단백질을 비교하여 후보 조절 단백질을 스크리닝한다. 마지막으로, CRISPR-Cas9 유전자 녹아웃 기술을 사용하여 LNP 리소좀 탈출에서 핵심 단백질의 기능적 역할을 검증한다. **예상 결론:** 본 연구는 LNP 지질 조성과 리소좀 탈출 효율 간의 직접적인 상관 관계 지도를 구축하여 탈출 효율에 영향을 미치는 핵심 지질 화학적 특징을 밝힐 것으로 예상된다. 리소좀 탈출의 정확한 시공간적 노드에서 LNP와 숙주 단백질 간의 동적 상호작용 네트워크를 처음으로 포착하고, 탈출 과정을 매개하거나 방해하는 몇 가지 핵심 숙주 인자 (예: 특정 막 융합 단백질, 지질 전달 단백질 또는 이온 채널)를 식별할 것이다. 이러한 발견은 LNP 리소좀 탈출의 분자 메커니즘을 밝히고, 효율적인 전달 시스템의 합리적인 설계를 위한 이론적 근거와 새로운 엔지니어링 목표를 제공하며, 핵산 약물 전달 기술의 발전을 촉진할 것이다.