Description du prompt

Le plasmide recombinant construit est introduit dans des souches hôtes d'E. coli. Des souches hôtes courantes telles que BL21(DE3) ou DH5α sont utilisées, et le plasmide recombinant est introduit dans les cellules bactériennes par choc thermique ou électroporation. Après que le plasmide est entré dans les cellules, la solution bactérienne est cultivée, et des colonies résistantes sont sélectionnées pour confirmer la transformation réussie. Par la suite, la souche recombinante est cultivée à grande échelle dans un milieu nutritif. Pendant la phase d'expression, un inducteur est ajouté pour initier l'expression des protéines. Par exemple, l'IPTG, couramment utilisé, peut induire l'expression efficace des gènes portant le promoteur T7 ; les premières méthodes de production utilisaient également le promoteur tryptophane (promoteur trp), qui exprime automatiquement le précurseur d'insuline après épuisement du tryptophane. En résumé, en optimisant les conditions d'expression et les formulations du milieu de culture, des niveaux élevés de chaîne A et de chaîne B d'insuline (ou de protéine précurseur) peuvent être obtenus dans E. coli.