1. Représentation de la scène principale Générez un schéma en format paysage avec un style d'illustration vectorielle scientifique, montrant clairement le principe de fonctionnement d'un système modulaire d'édition de gènes CRISPR-Cas9 pour les plantes. 2. Description détaillée de la scène (par module) Module 1 : Vecteur Plasmide (pDV003 - Gauche) Dessinez un grand plasmide circulaire. Étiquetez le module "Promoteur Pol II (CmYLCV)" sur l'anneau, en étendant une longue chaîne d'ARN horizontale (transcrit polycistronique) à partir de celui-ci. Sur la chaîne d'ARN, mettez en évidence deux séquences cibles en rouge vif et orange vif, étiquetées respectivement "gRNA : G5" et "gRNA : G4.2". Chaque séquence cible est flanquée de marqueurs de clivage uniques (tels que des losanges ou des trous de serrure), représentant les "sites de reconnaissance Csy4". Sous l'anneau du plasmide, dessinez une "cassette d'expression du gène rapporteur" séparée contenant le "promoteur FMV34S" et les icônes "mCherry ciblé sur les chloroplastes". Étiquetez la région "Site AarI & gène de sélection négative ccdB" au bas du plasmide. Module 2 : Traitement Csy4 et Maturation du gRNA (Milieu) À côté de la chaîne d'ARN, dessinez une protéine bleue ou verte en forme de "ciseaux moléculaires", étiquetée "ribonucléase Csy4". Montrez clairement la coupe de Csy4 aux deux sites de reconnaissance, clivant précisément la longue chaîne d'ARN pour libérer deux gRNA simple brin complets et indépendants. Module 3 : Optimisation de la Structure du sgRNA en Gros Plan (Milieu - Cadre Loupe) Ajoutez un cadre de gros plan de style loupe à l'un des gRNA libérés. À l'intérieur du cadre, comparez côte à côte : Gauche (Standard) : Une structure simple de courte tige-boucle, avec la note "sgRNA Standard" et la séquence "TTTT". Droite (Optimisé) : Une structure avec une tige-boucle significativement plus longue, avec la note "sgRNA Optimisé (Dang et al.)". Indiquez "extension de la région double brin (+5 pb)" et "mutation clé (T→C)" avec des flèches et du texte. Module 4 : Complexe Cas9 et Édition de Gènes (Droite) Dessinez un modèle structurel clair de la protéine SpCas9 (assemblage multi-domaines). Montrez un gRNA optimisé se liant à Cas9 pour former un "complexe ribonucléoprotéique Cas9/gRNA (RNP)". Dessinez deux doubles hélices d'ADN génomique bleues parallèles, étiquetées avec les points cibles "Locus Génomique G5" et "Locus Génomique G4.2". Montrez le complexe Cas9 se liant à la cible d'ADN et créant une "cassure double brin d'ADN (DSB)" en amont de la séquence PAM (indiquée par une cassure ou un symbole d'éclair). 3. Style et Exigences Visuelles Style général : Illustration vectorielle scientifique simple et semi-réaliste avec des lignes claires et une structure précise. Palette de couleurs : Utilisez des schémas de couleurs de revues académiques. Il est recommandé d'utiliser le bleu pour l'ADN et l'ARN.
1. Extraire l'ADN des feuilles. 2. Effectuer une PCR sur les...