Descripción del prompt

El plásmido recombinante construido se introduce en cepas huésped de E. coli. Se utilizan cepas huésped comunes como BL21(DE3) o DH5α, y el plásmido recombinante se introduce en las células bacterianas mediante choque térmico o electroporación. Después de que el plásmido entra en las células, se cultiva la solución bacteriana y se seleccionan colonias resistentes para confirmar la transformación exitosa. Posteriormente, la cepa recombinante se cultiva a gran escala en un medio nutritivo. Durante la fase de expresión, se añade un inductor para iniciar la expresión de la proteína. Por ejemplo, el IPTG, de uso común, puede inducir la expresión eficiente de genes que portan el promotor T7; los primeros métodos de producción también utilizaban el promotor triptófano (promotor trp), que expresa automáticamente el precursor de la insulina después del agotamiento del triptófano. En resumen, optimizando las condiciones de expresión y las formulaciones del medio de cultivo, se pueden obtener altos niveles de cadena A y cadena B de insulina (o proteína precursora) en E. coli.