Descripción del prompt

La preparación de insulina humana recombinante comienza con el diseño y la síntesis del gen de la insulina humana. La insulina humana consta de dos cadenas peptídicas, A y B; por lo tanto, típicamente se diseñan dos genes sintéticos: uno que codifica la cadena A y otro que codifica la cadena B. Los investigadores optimizan los codones preferidos por *E. coli* basándose en la secuencia de aminoácidos natural de la insulina y sintetizan químicamente estos dos segmentos de genes. Luego, se utilizan enzimas de restricción para insertar el gen de la cadena A o de la cadena B en un plásmido vector, construyendo un plásmido de expresión recombinante. El plásmido también necesita contener elementos funcionales como promotores y terminadores, y marcadores de resistencia a antibióticos para lograr una transcripción y selección eficientes del gen. Los vectores de expresión comúnmente utilizados generalmente portan promotores fuertes (como los promotores T7 o triptófano) y RBS para impulsar la expresión de alto nivel del gen insertado en la bacteria huésped. Aquí, los genes A y B se clonan por separado en plásmidos circulares. Como se muestra en la ilustración, el gen de la proinsulina (que contiene las secuencias de las cadenas A y B) se extrae del núcleo celular en la parte superior izquierda; el plásmido circular abierto con enzimas de restricción está en la parte superior derecha, y el vector contiene un promotor y un gen de resistencia. Después de la reacción enzimática, el gen de la cadena A y el gen de la cadena B se ligan en diferentes sitios del plásmido, formando un plásmido recombinante para la expresión posterior.