
"Nach Erhalt positiver Stämme wird eine großtechnische Fermentationskultur durchgeführt. Die rekombinante Insulinproduktion erfolgt typischerweise durch Hochdichtefermentation. Temperatur, pH-Wert und gelöster Sauerstoff werden im Fermenter kontrolliert, und Nährstoffe werden bereitgestellt, um das Zellwachstum zu fördern. Der Induktionszeitpunkt kann während des Fermentationsprozesses entsprechend dem Expressionsvektordesign angepasst werden: Beispielsweise wird IPTG hinzugefügt, um die Expression zu induzieren, wenn die Zelldichte ein bestimmtes Niveau erreicht, oder es wird ein Promoter-Selbstkontroll-Expressionssystem verwendet. Regulationsstrategien beeinflussen die endgültige Ausbeute. Die Verwendung eines professionellen Bioreaktors ermöglicht die Kontrolle der sterilen Umgebung und der Parameter, um die Ausbeute zu maximieren. In der Literatur wird berichtet, dass die E. coli-Fermentation Hunderte von Milligramm Insulinketten pro Liter Kulturmedium produzieren kann. Darüber hinaus kann die Fermentationskontrolle die Produktion von Inhibitoren reduzieren und die Ausbeute und Reinheit rekombinanter Proteine verbessern."
Schematische Darstellung von vier Schlüsselgenen, die an Ent...