Titel: Überlegene Ausbeute aus optimierten "Zellfabriken": Von erhöhter Ausbeute zu molekularen Fingerabdrücken Designkonzept: Verwenden Sie ein "Top-Down"- oder Flussdiagramm-Layout, um die funktionellen Vorteile und die detaillierte Validierung zu zeigen, die aus der ER-Expansion resultieren. Top-Übersicht/Zentrales Bild: Eine vereinfachte schematische Darstellung einer "Zellfabrik": Das Zentrum zeigt ein prominent hervorgehobenes, vergrößertes endoplasmatisches Retikulum (ER), beschriftet mit "Expandiertes ER". Drei Pfeilpfade gehen davon aus, die jeweils auf eines der drei Ergebnismodule unten zeigen. Drei Ergebnismodule nebeneinander angeordnet: Modul 1: Erhöhte Ausbeute und Qualität Symbole: Reagenzglas/Balkendiagramm-Symbol + Proteinkomplex-Symbol. Kerndaten/Abbildung: Ein prägnantes Balkendiagramm, das ELISA-Ergebnisse veranschaulicht: Die Antikörperproduktion in optimierten Stämmen (farbige Balken) ist um ein Vielfaches höher als in WT (grauer Balken). Ein prägnanter SEC-Chromatogramm-Vergleich: Der Hauptpeak des Multimers ist in optimierten Stämmen höher und schärfer (durchgezogene Linie). Abschließender Text: Ausbeute ↑ & Assemblierungsqualität ↑ Modul 2: Intrazellulärer Transport und molekulare Umgebung Symbole: Organell (ER, Vakuole) Schema + Molekül (BiP) Symbol. Kerndaten/Abbildung: Ein einfaches Flussdiagramm: Antikörper verweilen länger im "Expandierten ER" (Uhr-Symbol), und einige gelangen dann in die "Vakuole" (Pfeil zeigt an). Ein Immunoblot-Bandenvergleich (basierend auf Abbildung 4b): Optimierte Pflanzenbanden zeigen ein stärkeres BiP-Signal. Abschließender Text: ER-Verweildauer ↑ & Optimierte Faltungsumgebung Modul 3: Detaillierter chemischer Nachweis Symbole: Vereinfachtes Massenspektrometer-Diagramm + Glykanstruktur-Symbol. Kerndaten/Abbildung: Ein Tortendiagramm-Vergleich: Das linke Tortendiagramm stellt WT-Antikörper-Glykoformen dar, wobei der Komplex-Typ (blau) vorherrscht; das rechte Tortendiagramm stellt optimierte Pflanzenantikörper-Glykoformen dar, mit einem deutlich erhöhten Anteil an High-Mannose-Typ (orange). (Oder verwenden Sie eine vereinfachte Version von Abbildung 3b aus der Literatur, die Veränderungen im Anteil der Glykoformen an bestimmten Glykosylierungsstellen zeigt). Abschließender Text: High-Mannose-Typ Glykane ↑ (Chemischer Fingerabdruck der ER-Retention) Untere abschließende Zusammenfassungsbox: Text: Schlussfolgerung: Durch Host-Engineering haben wir eine hocheffiziente Proteinproduktionsplattform mit "erweitertem Raum, ausreichend Zeit und ausreichender Unterstützung" konstruiert, die eine globale Optimierung von Struktur zu Funktion erreicht.
Das konstruierte rekombinante Plasmid wird in E. coli Wirtss...