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SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2, Dengue, Zika, Fledermäuse... | SciDraw Gallery

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SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2, Dengue, Zika, Fledermäuse, Kamele, Schweine, Zibetkatzen, Affen, Aedes-Mücken, Menschen

Biomedizinisch

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SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2, Dengue, Zika, Fledermäuse, Kamele, Schweine, Zibetkatzen, Affen, Aedes-Mücken, Menschen

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2. Hypoxia
3. UV Radiation
4. Serum Depletion
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6. DTT/PFA
inside t25 flasks at 37 °C, 5% CO₂ for 48 hours, conflunce 80-90%: Hypoxia (The flask lid was tightly sealed with parafilm and the flask ). serum depletion (used 0.5% FBS ). glucose starvation (used low glucose media). used 2mM DTT and 25mM PFA. UV radiation: cells were subjected to five cycles of UV irradiation (5 minutes) followed by incubation (5 minutes), . to stimulate production of multivessicular bodies. → Isolating exosomes : Samples were centrifuged at 500 × g for 5 minutes at 4 °C, and the supernatant was removed. The cell pellet was resuspended in 5 mL PBS and centrifuged again at 952 rpm for 5 minutes at 4 °C. The pellet was discarded, and the supernatant was retained.

Ultracentrifugation: The clarified supernatant was transferred to ultracentrifuge tubes and spun at 100,000 g for 70 minutes at 4°C to pellet exosomes. Samples were centrifuged at 12,000 rpm for 60 minutes, and the exosome pellet was used for staining. → acridine orange Staining → Qualaitaive Analyzing via fluroscence microscope.

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Erstelle eine Abbildung, die das folgende experimentelle Verfahren illustriert: MCF7-Zellen wurden ausgesät und dann fünf verschiedenen zellulären Stressoren ausgesetzt: UV-Strahlung, Serumdeprivation, Glukosemangel, DTT/PFA-Behandlung und Hypoxie. Dies geschah, um die Produktion von Multivesikulärkörpern zu stimulieren. Exosomen wurden dann via Ultrazentrifugation isoliert, mit Acridinorange gefärbt und mittels Fluoreszenzmikroskopie analysiert.

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